1．氨基酸与多肽。
1.氨基酸的机构特点。
除了脯氨酸这些氨20种氨基酸(aa)的结构特点：
（1）均为l-氨基酸。
（2）均为α氨基酸，脯氨酸除外(α亚氨基酸)
（3）α-碳原子为不对称碳原子(甘氨酸除外)
（4）各种aa的r侧链各不相同。
2.氨基酸的等电点。
氨基酸所带静电荷为零时，溶液的ph值称为。
该氨基酸的等电点(isoelectric point),以pi表示。
特性：氨基酸溶解度最小。
3.氨基酸的pi计算。
一般氨基酸：pi=1/2(pk1+pk2)若一个aa有3个解离基团，则其pi为兼性离子两边pk的平均值。
4.氨基酸的特征化学反应。
一) α氨基参加的反应。
a.成盐作用。
b.亚硝酸反应。
van slyke 氨基氮测定的原理，用来检测蛋白质水解的程度。
c. 与2,4二硝基氟苯（dnfb）的反应。
分离dnp-氨基酸，用纸层析、hplc进行分析
应用：鉴定多肽或蛋白质的n-末端氨基酸。
d.与丹磺酰氯(dansyl chloride,dns-cl)反应：
与丹磺此法优点，丹磺酰-氨基酸有很强的荧光性质，检测灵敏度比dnfb高100倍，产物不必提取直接分析。
e.与异硫氰酸苯酯（pitc）的反应。
蛋白质测序：edman降解法(苯异硫氰酸酯法、pitc法、ptc法、pth法)
f.与茚三酮反应：氨基酸与水合茚三酮一起加热，生成蓝紫色化合物，在570nm处有最大吸收。
可用作aa含量分析。氨基酸与水合茚三酮共热，发生氧化脱氨反应，生成的nh3与还原茚三酮及水合茚三酮脱水缩合，生成蓝紫色化合物。
5.紫外吸收。
（苯丙氨酸，络氨酸，色氨酸） trp、tyr和 phe在280nm附近有一定的吸收。原因：分。
子中含有苯环(共轭双键).据此可以通过测定蛋白质溶液280nm的吸光值测定蛋白质含量。
6.侧链基团参加的反应。
侧链r基参加的呈色反应。
反应名称试剂组成对应氨基酸最终颜色。
millon（米伦）反应硝酸汞，亚硝酸汞和硝酸 tyr 红色。
folin（福林）反应9 磷钼酸和磷钨酸 tyr或trp
蓝色。sakoguchi
坂口)反应碱性次溴酸钠和α-萘酚 arg 红色。
pally 对氨基苯磺酸盐酸溶液，亚硝酸钠和碳酸钠 his和tyr 红色和橘黄色。
glyoxalate（乙醛酸）反应乙醛酸和浓硫酸 trp 紫色。
半胱氨酸反应亚硝酸-铁***的甲醇溶液 cys 红色。
7.肽键的概念和结构。
肽键(peptide bond) ：一个氨基酸的氨基与另一个氨基酸的羧基之间失水形成的酰胺键称为肽键。
8.肽单位的概念。
肽单位(peptide unit)：由肽键中的四个原子和与之相邻的两个碳原子共同构成的刚性平面。也称肽平面。
9.多肽的等电点。
当多肽溶液处于某一ph时，多肽分子为兼性离子，所带正负电荷相等，静电荷为零，此时的溶液的ph称为多肽的等电点。
10.多肽的双缩脲反应。
双缩脲反应：含两个以上肽键的化合物在碱性溶液中与硫酸铜作用呈紫色。
11.多肽的化学合成的原理。
合成肽的常规方法是从c-端向n-端进行。多肽的液相合成。
1)氨基酸的基团保护
2)接肽缩合反应。
3)除去保护集团。
循环反应。羧基与载体相连。
合成方向：c端到n端。
12.凯氏固氮法 n的含量平均为16%：凯氏(kjadehl)定氮法的理论基础蛋白质的含量=蛋白质的含氮量×100/16=蛋白质的含氮量×6.25
13.蛋白质的一级结构指蛋白质分子中氨基酸残基的种类、数量及排列顺序。包含的共价键主要指肽键和二硫键(disulfide bond).
14.蛋白质的一级结构测定的要求一级结构确定的原则：将大化小，逐段分析，制成两套肽片段，找出重叠位点，排出肽的前后位置，最后确定蛋白质的完整序列。
1.测定蛋白质的一级结构的要求： a) 样品必需纯(>97%以上) b) 知道蛋白质的分子量 c) 知道蛋白质由几个亚基组成 d）知道氨基酸组成。
15.蛋白质测序的方法。
16.大分子多肽氨基酸顺序的确定（重叠肽法)
17.二硫键的位置确定。
18.蛋白质二级结构的概念和组成。
19.ɑ螺旋的特征。
20.β转角。
21.蛋白质的超二级结构的概念。
22.蛋白质的结构域的概念。
23.蛋白质的三四级结构。
24.蛋白质一级结构与生物功能。
25.蛋白质的变构作用。
26.蛋白质的变性。
27.蛋白质的胶体性质。
28.蛋白质的等电点。
29.蛋白质沉淀反应（几种方法及优缺点）
30.蛋白质的颜色反应。
31.抗原决定簇。
32.蛋白质的分离与纯化。
33.分子排阻色谱的原理。
34.聚丙烯酰胺凝胶电泳。
2019生物化学考点
一 氨基酸的分类 根据侧链r基的结构不同，氨基酸可分为脂肪族氨基酸 芳香族氨基酸和杂环氨基酸 根据侧链在水溶液中的性质，20种氨基酸可分为以下四类 1 中型非极性氨基酸其侧链含有烃基。侧链均不带电荷，且不能与环境中的水分子互相作用。因此，组成蛋白时，多构成球状蛋白质疏水的核心以及跨膜蛋白质与膜磷脂相...
生物化学作业
第一章 第四章。一 名词解释1.标准氨基酸2.肽键。3.蛋白质的一级结构4.螺旋5.亚基。6.蛋白质的等电点7.蛋白质的变性8.5 核苷酸的熔点10.增色效应11.酶蛋白12.辅酶。13.酶的活性中心14.同工酶。15.酶的最适温度16.酶的最适ph值。18.竞争性抑制剂。19.酶的不可逆抑制作用2...
《生物化学》作业
生物化学 作业。一 单选题 1 蛋白质变性是由于 d a 蛋白质氨基酸组成的改变b 蛋白质氨基酸顺序的改变c 蛋白质肽键的断裂d 蛋白质空间构象的破坏e 蛋白质的水解。2 温度对酶促反应的影响，正确的是a a 温度愈高酶促反应愈快b 存在最适温度。c 低温时酶变性而失活d 酶通常应保存在室温的环境中...