第一章原核微生物。
第一节细菌。
一、细胞的形态和大小。
一)细菌的形态。
基本形态。球状: 细胞个体呈球形或椭圆形,不同种的球菌在细胞**时会形成不同的空间排列方式,常被作为分类依据。
杆状; 细胞呈杆状或圆柱形,一般其粗细(直径)比较稳定,而长度则常因培养时间、培养条件不同而有较大变化。
螺旋状: 菌体回转如螺旋,螺旋数目和螺距大小种而异。鞭毛二端生细胞壁坚韧,菌体较。
硬。弧菌:菌体只有一个弯曲,其程度不足一圈,形似“c”字或逗号,鞭毛偏端生。
螺旋体菌:菌体柔软,用于运动的类似鞭毛的轴丝位于细胞外鞘内。
二)细菌的大小。
细菌的大小测量单位是um
大小的测量方法。
显微镜测微尺。
显微照相后根据放大倍数进行测算。
5、染色。由于细菌细胞微小又透明,一般先要经过染色才能作显微观察。
简单染色法。
正染色法革兰氏染色。
鉴别染色法抗酸性染色法。
死菌芽孢染色法。
细菌染色负染色:荚膜染色法姬姆萨染色法。
活菌用美蓝或ttc等作活菌染色。
二、细胞的细胞结构。
一般结构:一般细菌都有的构造。
特殊结构:部分细菌具有的或一般细菌在特殊环境下才有的。
一)细胞壁。
细胞壁是位于细胞表面,内侧紧贴细胞膜的一层较为坚韧,略具弹性的细胞结构。约占干重的10~20%。
1、细胞壁的功能。
维持细胞外形;
保护细胞免受外界因素的损伤;
是鞭毛运动所必需的支点;
阻挡有害物质进入;
与细菌的抗原性、致病性以及对噬菌体的敏感性有关。
2、细胞壁的化学组成与结构。
主要成分为肽聚糖(原核微生物特有的成分)还结合有磷壁酸、脂多糖、脂蛋白等成分。
不同种类的细菌,细胞壁的化学组成和结构不完全相同。
通过革兰氏染色法可将所有的细菌分为革兰氏阳性(g+)菌和革兰氏阴性(g-)菌两种。
g+菌细胞壁化学组成以肽聚糖为主。这是原核微生物所特有的成份,占细胞壁物质总量的40~90%。
磷壁酸又名垣酸,是大多数g+菌所特有的成分,约占细胞壁成分的10%。
2)革兰氏阴性菌的细胞壁成分。
g-细胞壁的组成和结构比g+更复杂。主要成份为:脂多糖、磷脂、脂蛋白、肽聚糖。
g-有肽聚糖,仅占细胞壁干重的5~10%。肽聚糖结构与g+相同,但短肽尾中的3号位上l-lys往往被其他二氨酸取代
外壁层是g-细菌细胞壁所特有的结构它位于壁的最外层,化学成分为脂多糖、磷脂和若干种外蛋白。
3)g+ 细菌与g -细菌细胞壁的比较。
4、用一种与结晶紫具有不同颜色的碱性染料对涂片进行复染。例如沙黄,它使原来无色的革兰氏阴性细菌最后呈现桃红到红色,而革兰氏阳性细菌继续保持深紫色。
革兰氏染色的机理与细胞壁的化学组成和结构有关。
g+ 菌:细胞壁厚,肽聚糖含量高,交联度大,当乙醇脱色时,肽聚糖因脱水而孔径缩小,故结晶紫—碘的复合物被阻留在细胞内,细胞不能被酒精脱色,仍呈紫色。
gˉ菌:肽聚糖层薄,交联松散,乙醇脱色不能使其结构收缩,又因其含脂量高,乙醇将脂溶解,缝隙加大,结晶紫—碘的复合物溶出细胞壁,酒精将细胞脱色,细胞呈无色,沙黄复染后呈红色。
二)细胞膜与间体。
1)细胞膜概念:
细胞质膜,又称质膜、细胞膜或内膜,是紧贴在细胞壁内侧、包围着细胞质的一层柔软、脆弱、富有弹性的半透性薄膜,厚约7~8nm,由磷脂(占20%~30%)和蛋白质(占50%~70%)组成。
2)细胞膜的化学组成与结构模型:
a. 磷脂。
b. 液态镶嵌模型。
膜的主体是脂质双分子层;
脂质双分子层具有流动性;
整合蛋白因其表面呈疏水性,故可“溶”于脂质双分子层的疏水性内层中;
周边蛋白表面含有亲水基团,故可通过静电引力与脂质双分子层表面的极性头相连;
脂质分子间或脂质与蛋白质分子间无共价结合;
脂质双分子层犹如一“海洋”,周边蛋白可在其上作“漂浮”
运动,而整合蛋白则似“冰山”状沉浸在其中作横向移动。
3)细胞膜的生理功能:
选择性地控制细胞内、外的营养物质和代谢产物的运送;
是维持细胞内正常渗透压的屏障;
合成细胞壁和糖被的各种组分(肽聚糖、磷壁酸、lps、 荚膜多糖等)的重要基地;
膜上含有氧化磷酸化或光合磷酸化等能量代谢的酶系,是细胞的产能场所;
是鞭毛基体的着生部位和鞭毛旋转的供能部位;
4)间体(mesosome,或中体):细胞质膜内褶而形成的囊状构造,其中充满着层状或管状的泡囊。多见于革兰氏阳性细菌。
青霉素酶分泌、dna复制、分配以及细胞**有关。
间体”仅是电镜制片时因脱水操作而引起的一种赝像。
三)细胞质和内含物。
1)概念:细胞质是细胞质膜包围的除核区外的一切半透明、胶状、颗粒状物质的总称。含水量约80%。
细胞质的主要成分为核糖体、贮藏物、多种酶类和中间代谢物、质粒、各种营养物和大分子的单体等,少数细菌还有类囊体、羧酶体、气泡或伴孢晶体等。
2)核糖体。
核糖体是细胞质中的一种核糖核蛋白的颗粒状物质,由核糖核酸(60%)和蛋白质(40%)组成,常以游离状态或多聚核糖状态分布于细胞质中。其沉降系数均为70s。它是蛋白质的合成场所。
3)气泡。功能:调节细胞比重以使细胞漂浮在最适水层中获取光能、o2和营养物质。
4)颗粒状内含物。
贮藏物是一类由不同化学成分累积而成的不溶性沉淀颗粒,主要功能是贮存营养物。
异染粒。颗粒大小为0.5~1.0μm,是无机偏磷酸的聚合物,一般在含磷丰富的环境下形成。功能是贮藏磷元素和能量,并可降低细胞的渗透压。
聚-β-羟丁酸(phb)
类脂性质的碳源类贮藏物。
多糖类贮藏物糖原粒。
淀粉粒。在真细菌中以糖原为多糖原粒较小,不染色需用电镜观察,用碘液染成褐色,可在光学显微镜下看到。
有的细菌积累淀粉粒,用碘液染成深兰色。
硫粒。在环境中还原性硫素丰富时,常在细胞内以折光性很强的硫粒的形式积累硫元素。
当环境中环境中还原性硫缺乏时,可被细菌重新利用。
四)核区。原核生物所特有的无核膜结构、无固定形态的原始细胞核。
五)细菌细胞的特殊结构。
1) 概念。
某些细菌细胞表面着生的一至数十条长丝状、螺旋形的附属物,具有推动细菌运动功能,为细菌的“运动器官”。
2)观察和判断细菌鞭毛的方法。
电子显微镜直接观察。
鞭毛长度:15~20μm;直径:0.01~0.02μm
光学显微镜下观察:鞭毛染色和暗视野显微镜。
根据培养特征判断:半固体穿刺、菌落(菌苔)形态。
2、菌毛。长在细菌体表的纤细、中空、短直、数量较多的蛋白质类附属物,具有使菌体附着于物体表面的功能。
每个细菌约有250~300条菌毛。有菌毛的细菌一般以革兰氏阴性致病菌居多,借助菌毛可把它们牢固地粘附于宿主的呼吸道、消化道、泌尿生殖道等的粘膜上,进一步定植和致病。
性毛(pili,单数pilus)
构造和成分与菌毛相同,但比菌毛长,数量仅一至少数几根。
3、糖被。1) 概念。
包被于某些细菌细胞壁外的一层厚度不定的胶状。
物质。糖被按其有无固定层次、层次厚薄又可细分为荚膜(大荚膜)、微荚膜、粘液层和菌胶团。
2)特点。a. 主要成分是多糖、多肽或蛋白质,尤以多糖居多。经特殊的荚膜染色,特别是负染色(又称背景染色)后可在光学显微镜清楚地观察到它的存在。
b. 产生糖被是微生物的一种遗传特性,其菌落特征及血清学反应是是细菌分类鉴定的指标之一。
c.荚膜等并非细胞生活的必要结构,但它对细菌在环境。
中的生存有利。
d. 细菌糖被与人类的科学研究和生产实践有密切的关系。
3)功能。保护细菌免受干燥的影响;
贮藏养料,以备营养缺乏时重新利用;
与病原菌的毒性密切相关;
能抵抗吞噬细胞的吞噬
4、特殊的休眠构造——芽孢。
1)概念。某些细菌在其生长发育后期,在细胞内形成一个圆形或椭圆形、厚壁、含水量极低、抗逆性极强的休眠体,称为芽孢或内生孢子。
2)细菌芽孢的特点。
整个生物界中抗逆性最强的生命体,是否能消灭芽孢是衡量各种消毒灭菌手段的最重要的指标。
芽孢是细菌的休眠体,在适宜的条件下可以重新转变成为营养态细胞;产芽孢细菌的保藏多用其芽孢。
产芽孢的细菌多为杆菌,也有一些球菌。芽孢的有无、形态、大小和着生位置是细菌分类和鉴定中的重要指标。
芽孢与营养细胞相比化学组成存在较大差异,容易在光学显微镜下观察。(相差显微镜直接观察;芽孢染色)
3)芽孢的耐热机制。
5、伴孢晶体。
少数芽孢杆菌,例如苏云金芽孢杆菌在其形成芽孢的同时,会在芽孢旁形成一颗菱形或双锥形的碱溶性蛋白晶体——δ内毒素,称为伴孢晶体。
特点:不溶于水,对蛋白酶类不敏感;容易溶于碱性溶剂。
伴孢晶体对200多种昆虫尤其是鳞翅目的幼虫有毒杀作用,因而可将这类产伴孢晶体的细菌制成有利于环境保护的生物农药——细菌杀虫剂。
三、细菌的繁殖。
细菌主要是通过无性繁殖产生后代。其繁殖方式是二**,简称裂殖。
细菌的繁殖过程分为三个连续步骤:
核的**和隔膜的形成;
横隔壁形成;
子细胞**。
另外有的细菌还存在:三**和复**。
1)、二**。
2)、不等二**。
二)细菌的群体形态。
一)、在固体培养基上(内)的群体形态。
在固体培养基表面或内层,以一个至少数几个微生物细胞为中心而繁殖成的一堆肉眼可见的、有一定形态结构等特征的子细胞集团称为菌落;当固体培养基表面有许多菌落连成一片时,称为菌苔。
细菌菌落的共同特征:
湿润、黏稠、易挑起,质地均匀,色泽一致,常有臭味等。
第二节放线菌。
一、概念。放线菌是一类呈菌丝状生长、主要以孢子繁殖和陆生性强的革兰氏染色阳性原核微生物,属于真细菌范畴。
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