甘蓝与大白菜的原生质体融合。
技术]使用纤维素酶和果胶酶能降解细胞壁成分,除去细胞壁。聚乙二醇(peg)法诱导原生质体融合。(将利用白菜与甘蓝的下胚轴与子叶在果胶酶与纤维素酶的作用下分离出原生质体,再利用peg融合液使原生质体融合。
)方法]利用培养好的甘蓝与白菜的幼苗在果胶酶与纤维素酶的作用下分离出原生质体,再利用peg融合液将这2种原生质体融合。
结论]近缘物种间的原生质体融合,这种融合方式可以获得稳定的、可育的细胞杂种植株,可以直接作为育种的种质材料。通过该试验,可以为远缘杂交奠定基础,远缘不亲和的物种间的原生质体融合,可以获得常规有性杂交得不到的无性杂交植株,这不仅克服了远缘杂交不亲和性,还可以扩大变异范围,产生新的种质。
体会:白菜与甘蓝的原生质体融合在理论和实践上都有很大的意义,在植物遗传工程和育种研究上具有广阔的应用前景。原生质体融合是植物同源、异源多倍体获得的途径之一,它不仅能克服远缘杂交有性不亲和障碍,也可以克服传统的通过有性杂交诱导多倍体植株的困难。
白菜与甘蓝的原生质体成功融合,并获得了稳定的、可育的细胞杂种植株,可以直接作为育种的种质材料。这项研究拓展了生物研究的视野,白菜、甘蓝的成功,让我们开始思考其他类似的物种之间是否也能成功,比如说苹果和梨、枣子和梅子、柑橘和柚子等。如果说这些物种之间也能成功的话,这不仅意味着能产生很多新物种,而且可以利用这项技术还能改善很多水果的美中不足,比如柑橘和柚子,柚子具有败火的功效但是柚子的皮很厚,不容易获得果肉,而橘子的皮却很薄,它们的组合体要是既具有败火的功效有具有皮薄的特点,那么就更符合我们人们的需求了。
同时,作为我们这样还走在去往生物研究路上的人,白菜与甘蓝的原生质体成功融合也给我们指明了方向,我们的研究可以致力于这方面的研究,改造一些物种的不足之处,满足人们更多的需求。
豌豆根瘤菌与新疆中华根瘤菌原生质体的属间融合研究。
技术]抗生素抗性标记的筛选、原生质体的融合、采用乙炔还原法测定固氮酶活、根瘤菌的回接采用水培法、sds全细胞可溶性蛋白电泳分析。
方法]以青霉素和氯霉素分别作为rhizobium leguminosorum usda2370 和sinorhizobium xinjiangnesis ccbau110 的抗药性标记。利用原生质体融合技术, 获得usda2370 和ccbau110 的属间融合菌株。
结论]利用原生质体融合技术, 成功地获得了usda2370 和ccbau110 的属间融合菌株。该融合菌株可分别在双亲寄主植物上结瘤。以不同寄主**, 不同种的根瘤菌为材料, 探索原生质体形成、再生及融合的条件和方法时,发现:
100gml的青霉素和50gml的氯霉素可分别作为usda2370和ccbau110的抗药性标记。
1mg/ml浓度的溶菌酶破壁效果比0.2mg/ml的强。
24h 为最佳预处理时间,在此时溶菌酶对细胞壁的破壁作用最强。
体会:据报道, 通过原生质体融合能产生两个亲本各自所产生的抗生素, 并将亲本所产抗生素的产量提高。近年来, 我国学者利用原生质体融合技术在提高谷氨酸产量、抗生素效价等方面也取得了许多进展。
如何利用原生质体融合技术选育结瘤范围广、固氮酶活高的优良菌株, 目前还未见报道。
本实验成功地获得了豌豆根瘤菌与新疆中华根瘤菌原生质体的属间融合体,并探索了它们融合的条件和方法。对于我们生产应用方面而言,这项实验是非常有意义的。生物固氮作用有很大潜力,估计全球每年生物固氮作用所固定的氮(n2)约达17500万吨,其中耕地土壤约有4400万吨,超过了每年施入土壤4000万吨肥料氮素(工业固氮)的量。
因此,如果我们能够优化固氮菌株,提高固氮酶活性、扩大结瘤范围,生物的固氮量就会被大大的提高。这样,生物固氮有望完全取代工业固氮,在节约能源、节省劳动力、减少污染等方面都能做出巨大的贡献。
对我们的启示就是,生物固氮作用潜力很大,那么对生物固氮的研究潜力也将是巨大的。这次试验的**可能只是研究路上的一小步,我们应该把目光聚焦在长远的发展,争取在生物固氮的研究方面有更大的突破。
学年第二学期期末试卷标准答案 细胞工程A
一 名词解释 每题3分,共18分 1.植物细胞工程 是一种利用离体培养细胞,按照预先设计,有目的 有计划地对植物细胞进行遗传操作,使其遗传和生物学特性改变,从而实现植物品种改良和创新的生物技术。绪论 2.植物生长调节剂 指由人工合成的,能够调控植物生长发育的化学物质,其化学结构类似于植物激素的结构,...
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