涂抹检测作业指导书

1目的。

涂抹试验为确定表面洁净度的检验方法，其方便，可操作性强，且能够反应出监控点的表面洁净程度。为保证对涂抹试验检验结果准确，统一操作方法，提高检验人员的技术操作性，特制定本作业指导书。

2 适用范围。

本作业指导书适用于清谷田园食品****。

3 规范性引用标准。

gb 4789.3-2016《食品安全国家标准食品微生物学检验大肠菌群计数》。

gb 4789.2-2016《食品安全国家标准食品微生物学检验菌落总数测定》。

gb 4789.15-2016《食品安全国家标准食品微生物学检验霉菌和酵母计数》。

4 材料。除微生物实验室常规灭菌及培养设备外，其他设备和材料如下：

1)无菌生理盐水，称取8.5ｇ氯化钠溶于1000ml蒸馏水中，121℃高压灭菌15min。

2)涂抹纸，经121℃高压灭菌15min的，符合检测使用的单位面积的滤纸。保证涂抹面积50平方厘米或 100 平方厘米。

3)涂抹瓶：符合涂抹实验规格的150ml或250ml的灭菌后的三角瓶。

5 样品贮存。

针对涂抹检测时间问题统一要求：涂抹样于4～8℃冰箱冷藏 12 小时，检测所得菌落数可以代表其卫生指标。

需注意事项如下：

1)留样待测的样品必须密封好；

2)留样待测的样品不得出现脱水或失水；

3)留样待测的样品于4～8℃避光贮存，但不可低于4℃，不可冷冻；

4)取出留样待测的样品不可立即检验，需将样品在室温的环境下放置一会（20min 左右）开瓶检测；

5)从开瓶到检测结束应尽可能在短时间内完成，整个过程应按无菌操作进行。

6 涂抹操作步骤。

具体操作步骤如下：

1)进入车间先经过消毒池消毒；

2)在洗手池洗手消毒；

3)涂抹前用75%的酒精棉球对手和镊子消毒；

4)用消毒镊子取25cm2湿润灭菌涂抹纸，贴（或涂）于被涂抹物表面，使之充分接触，贴完50cm2后，立即放入装有50ml灭菌生理盐水的涂抹瓶中，盖好瓶塞，使涂抹纸与盐水充分混合并做好标识；

5)如遇到辅料涂抹，50ml样品不足检测量时，可以采取扩大涂抹面积，如涂抹纸片使用100c㎡的，生理盐水使用200ml,其它操作同上。

菌落总数的检测执行原液，即涂抹检验的检测对象为涂抹后原液，即使用原液依据gb4789.2《食品安全国家标准食品微生物学检验菌落总数测定》检测，结果报告时，以平均菌落数乘以最低稀释倍数报告，未长菌以小于1乘以最低稀释倍数报告。

大肠菌群依据 gb 4789.3《食品安全国家标准食品微生物学检验大肠菌群计数》，具体操作细节参照《大肠菌群检测作业指导书》中第一法传统微生物法大肠菌群的检验，大肠双料选原液其它六管依据方法要求稀释。依据 gb 4789.

3 中的第一法大肠菌群计数原则，结果报告根据其接种量(接种量根据标准确定)而定，单位为 mpn/cm2。

霉菌和酵母菌依据gb 4789.15《食品安全国家标准食品微生物学检验霉菌和酵母计数》。霉菌、酵母菌直接检测原液即可，但要求必须摇匀，加强振摇的目的是破坏菌液中孢子，有益于后期培养长出的霉菌、酵母菌的计数。