专业：生物工程姓名：潘红波学号：1025004350
1、 从分离原理、仪器构造及应用范围上简要比较气相色谱及液相色谱的异同点。
答：二者都是根据样品组分与流动相和固定相相互作用力的差别进行分离的。
从仪器构造上看，液相色谱需要增加高压泵以提高流动相的流动速度，克服阻力。同时液相色谱所采用的固定相种类要比气相色谱丰富的多，分离方式也比较多样。气相色谱的检测器主要采用热导检测器、氢焰检测器和火焰光度检测器等。
而液相色谱则多使用紫外检测器、荧光检测器及电化学检测器等。但是二者均可与ms等联用。
二者均具分离能力高、灵敏度高、分析速度快，操作方便等优点，但沸点太高的物质或热稳定性差的物质难以用气相色谱进行分析。而只要试样能够制成溶液，既可用于hplc分析，而不受沸点高、热稳定性差、相对分子量大的限制。
2、 液相色谱中影响色谱峰展宽的因素有哪些？ 与气相色谱相比较， 有哪些主要不同之处？
答：液相色谱中引起色谱峰扩展的主要因素为涡流扩散、流动的流动相传质、滞留的流动相传质以及柱外效应。
在气相色谱中径向扩散往往比较显著，而液相色谱中径向扩散的影响较弱，往往可以忽略。另外，在液相色谱中还存在比较显著的滞留流动相传质及柱外效应。
3、在液相色谱中， 提高柱效的途径有哪些？其中最有效的途径是什么？
答：液相色谱中提高柱效的途径主要有：
1).提高柱内填料装填的均匀性； 减小粒度；选择薄壳形担体；
2).改进固定相。
3).选用低粘度的流动相。
4).适当提高柱温。
其中，减小粒度是最有效的途径。
4、 液相色谱有几种类型？它们的保留机理是什么？ 在这些类型的应用中，最适宜分离的物质是什么？
答：:液相色谱有以下几种类型：液-液分配色谱； 液-固吸附色谱；离子交换色谱； 离子对色谱； 空间排阻色谱等。
其中；液-液分配色谱的保留机理是通过组分在固定相和流动相间的多次分配进行分离的。可以分离各种无机、有机化合物。
液-固吸附色谱是通过组分在两相间的多次吸附与解吸平衡实现分离的。最适宜分离的物质为中等相对分子质量的油溶性试样，凡是能够用薄层色谱分离的物质均可用此法分离。离子色谱中由于键合基团不能全部覆盖具有吸附能力的载体，所以同时遵循吸附和分配的机理，最适宜分离的物质为与液-液色谱相同。
离子交换色谱和离子色谱是通过组分与固定相间亲合力差别而实现分离的。各种离子及在溶液中能够离解的物质均可实现分离，包括无机化合物、有机物及生物分子，如氨基酸、核酸及蛋白质等。
在离子对色谱色谱中，样品组分进入色谱柱后，组分的离子与对离子相互作用生成中性化合物，从而被固定相分配或吸附进而实现分离的。各种有机酸碱特别是核酸、核苷、生物碱等的分离是离子对色谱的特点。
空间排阻色谱是利用凝胶固定相的孔径与被分离组分分子间的相对大小关系，而分离、分析的方法。最适宜分离的物质是分子质量较大的物质。
5、 何为正相色谱及反相色谱？在应用上有何特点？
答：在液-液色谱法中，一般为了避免固定液的流失，对于亲水性固定液常采用疏水性流动相，即流动相的极性小于固定相，及正相液-液色谱法，应用于分离非极性物质；反之若流动相的极性大于固定液的极性，即反相液-液色谱法，应用于分离极性物质。
6、 何谓化学键合固定相？它有什么突出的优点？
答：利用化学反应将固定液的官能团键合在载体表面形成的固定相称为化学键合固定相。
优点：固定相表面没有液坑，比一般液体固定相传质快的多。无固定相流失，增加了色谱柱的稳定性及寿命。
可以键合不同的官能团，能灵活地改变选择性，可应用与多种色谱类型及样品的分析。有利于梯度洗提，也有利于配用灵敏的检测器和馏分的收集。
7、 何谓化学抑制型离子色谱及非抑制型离子色谱？试述它们的基本原理。
答：在离子色谱中检测器为电导检测器，以电解质溶液作为流动相，为了消除强电解质背景对电导检测器的干扰，通常除了分析柱外，还增加一根抑制柱，这种双柱型离子色谱法称为化学抑制型离子色谱法。没有抑制柱的离子色谱法称为非抑制型离子色谱。
分离阴离子，常使用naoh溶液为流动相，钠离子的干扰非常严重，这时可在分析柱后加一根抑制柱，其中装填高容量h+型阳离子交换树脂，通过离子交换，使naoh转化为电导值很小的h2o，从而消除了背景电导的影响。但是如果选用低电导的流动相（如１×10-４~5 ×10-4mol的苯甲酸盐或邻苯二甲酸盐），则由于背景电导较低，不干扰样品的检测，这时候不必加抑制柱，只使用分析柱，称为非抑制型离子色谱法。
8、 何谓梯度洗提？它与气相色谱中的程序升温有何异同之处？
答：在一个分析周期内，按一定程序不断改变流动相的组成或浓度配比，称为梯度洗提．是改进液相色谱分离的重要手段．
梯度洗提与气相色谱中的程序升温类似，前者连续改变的是流动相的极性、ph或离子强度，而后者改变的温度，程序升温也是改进气相色谱分离的重要手段。
9、 高效液相色谱进样技术与气相色谱进样技术有和不同之处？
答：在液相色谱中为了承受高压，常常采用停流进样与高压定量进样阀进样的方式。
10、 以液相色谱进行制备有什么优点？
答：以液相色谱进行制备时，分离条件温和，分离检测时不会导致试样被破坏，且易于**原物。
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