一、简述石蜡切片制作的基本过程。
1、取材固定,2、脱水透明,3、浸蜡包埋,4、切片贴片,5、脱蜡染色,6、脱水透明,7、树脂封固。
二、光学显微镜的分辨率是指分辨物体最小间隔的能力 , 与光源的波长 、 介质的折射率 、 物镜的孔径角有关。
三、为了提高显微镜分辨率,光源的波长、介质的折射率、物镜的孔径角应如何改变?
1、缩短光源的波长,2、增加介质的折射率,3、增大物镜的孔径角。
四、用于动物细胞培养的组织和细胞大都取自胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织,其主要原因是(d)。
a、容易产生各种变异,b、具有更强的全能性,c、取材十分方便,d、**增殖的能力强。
五、在动物细胞培养过程中,使用胰蛋白酶的作用是(a)。
a、使组织分散为单个细胞,或使组织从瓶壁上脱落,制成悬浮液;b、促进蛋白质水解,为细胞**和生长提供多肽营养;c、去掉细胞膜上的糖被,有利于细胞融合;d、去掉细胞膜,保证两种细胞的细胞质和细胞核融合。
六、动物细胞培养需要控制的条件有(a)。①无菌、无毒环境;②营养;③温度和ph;④气体环境。
a、①②b、②③c、①②d、①②
七、成骨细胞原代培养主要有哪几种方法?
1、骨组织植块培养法,2、骨组织酶消化培养法,3、骨膜组织植块培养法,4、骨髓诱导培养法。
八、成骨细胞鉴定的主要方法有哪些?
1、细胞形态观察,2、碱性磷酸酶染色,3、矿化结节染色, 4、碱性磷酸酶活性定量,(5)分泌蛋白测定(bgp、col-1等)。
九、破骨细胞培养主要有哪几种方法?
1、成熟破骨细胞分离培养法,2、骨髓单核细胞诱导培养法,3、外周血单核细胞诱导培养法,4、脾干细胞诱导培养法。
十、诱导破骨细胞形成和分化的关键细胞因子是 rankl 、 m-csf 。
十。一、多核破骨细胞是由单核破骨细胞 、 多核破骨细胞以及单核与多核破骨细之间经反复融合而形成,破骨细胞的融合过程均发生在贴壁状态。
十。二、破骨细胞鉴定的主要方法有哪些?
1、细胞形态观察,2、抗酒石酸酸性磷酸酶染色,3、抗酒石酸酸性三磷酸腺苷酶染色,4、噬骨试验与扫描电镜观察,5、降钙素受体染色,6、降钙素反应(应答)。
十。三、用骨磨片噬骨试验进行破骨细胞鉴定时,扫描电镜下可观察到骨吸收陷窝 、 坑洼 、 沟道及位于陷窝、坑洼、沟道内的破骨细胞 。
十。四、名词解释。
1、原代培养:从体内取出细胞和组织的第一次培养。
2、传代培养:将细胞从一个培养容器转移或移植到另一培养容器中进行再培养。
3、单层培养:培养细胞在底物上长成单层。
4、悬浮培养: 细胞在培养液中呈悬浮状态生长。
5、接触抑制: 细胞汇合相互接触后失去运动的现象。
6、密度抑制: 细胞达到一定数量后引起抑制增殖的现象。
7、细胞系:指原代细胞培养物经首次传代成功后所繁殖的细胞群体。 也指可长期连续传代的培养细胞。
8、细胞株:通过选择法或克隆形成法从原代培养物或细胞系中获得的具有特殊性质或标志的培养物称细胞株。
9、体外培养转化:细胞在体外培养中发生与原细胞遗传性状不同的变化,但不一定具有致癌性。
10、体外恶性转化:细胞在体外培养过程中获得了致瘤性,当把这种细胞接种于适当的动物,可以产生肿瘤。
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