1 试剂和设备。
1.1 硫酸：化学纯，含量为98%，无氮。
1.2 混合催化剂：0.4g硫酸铜，5个结晶水，6g硫酸钾，均为化学纯，磨碎混匀。
1.3 氢氧化钠：化学纯，40%水溶液（m/v）。
1.4 硼酸：化学纯，2%水溶液(m/v)。
1.5 混合指示剂：甲基红0.1%乙醇溶液，溴甲酚绿0.5%乙醇溶液，两溶液等体积混合，在阴凉处保存前为三个月。
1.6 盐酸标准溶液：邻苯二甲酸氢钾标定，按gb601制备。
1.6.1 0.1mol/l盐酸标准溶液：8.3ml盐酸，分析纯，注入1000ml蒸馏水中。
1.6.2 0.02mol/l盐酸标准溶液：1.67ml盐酸，分析纯，注入1000ml蒸馏水中。
1.7 蔗糖：分析纯。
1.8 硫酸铵：分析纯，干燥。
1.9 硫酸吸收液：1%硼酸水溶液1000ml，加入0.
1%溴甲酚绿乙醇溶液10ml，0.1%甲基红乙醇溶液7ml，4%氢氧化钠水溶液0.5ml，混合，置阴凉处保存1个月。
1.10 饲料粉碎机。
1.11 标准筛：孔径0.45mm（40目）。
1.12 分析天平：感量0.0001g。
1.13 x08a型自动消化装置。
1.14 k06全自动凯氏定氮仪。
2 检测步骤。
2.1 样品制备：
选取具有代表性的试样用四分法缩减至200g，粉碎后全部过40目筛，装于密封容器中，防止试样成本变化。
2.2 试样的消煮。
称取试样0.5-1g（含氮量5-80mg）准确至0.0002g，放入消化管中，加入6.
4g催化剂，与试样混合均匀，再加入12ml硫酸，将消化管置于消化装置上420℃加热，直至呈透明的蓝绿色。
2.3 试样定氮和滴定。
2.3.1将消化好的消化管置于蒸馏装置的托盘上，落下安全门。
2.3.2 仪器开启后，按“设定”键光标显示在“换算系数”栏目中输入需要换算的数值6.25。
2.3.3 按“↑”键将光标移入“碱量”栏目中，输入需要的碱量体积50ml。
2.3.4 按“↑”键将光标移入“吸收液量”栏目中，输入需要的吸收液量的体积30ml。
2.3.5 按“↑”键将光标移入“样品量”栏目中，输入需要的样品量质量。
2.3.6 按“↑”键将光标移入“样品编号”栏目中，输入样品编号。
2.3.7 按“run”键开始蒸馏工作，同时保存设定的参数。
2.3.8 滴定至终点时，仪器自动停止蒸馏。
2.3.9 按“保存”键返回主界面，再按“数据键”进去查看数据，选择要查看的样品编号，按“确定”键查看结果。
2.3 计算公式。
式中：－滴定试样时所需标准酸溶液体积，单位为ml；
滴定空白时所需标准酸溶液体积，单位为ml；
-盐酸标准溶液浓度，单位为mol/l；
试样质量，单位为g；
试样分别液总体积；单位为ml；
试样分解液蒸馏用体积，单位为ml；
0.0140－每毫克当量氮的克数；
6.25－氮换算成蛋白质的平均系数。
2.4 重复性。
2.4.1 每个试样取两个平行样进行测定，以其算术平均值为结果。
2.4.2 当粗蛋白质含量在25%以上时，允许相对偏差为1%；
当粗蛋白质含量在10%-25%之间时，允许相对偏差为2%；
当粗蛋白质含量在10%以下时，允许相对偏差为3%；
3 参考文件。
gb/t 6432-1994 饲料中粗蛋白测定方法》
4 相关记录。
定氮类检测原始记录》
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