2019小黑麦实验方案

不同氮效率小黑麦基因型吸收利用氮素差异研究。

一、试验目的。

针对不同氮效率小黑麦基因型通过不同供氮水平的溶液培养试验，**小黑麦溶液培养的最适供氮水平；**氮高效基因型小黑麦对氮素的吸收利用特征。

二、试验设计。

一）供试材料：不同氮效率小黑麦品种3个，其中高效品种2个p1429186和clxt82，低效品种1个clxt74。

二）营养液配方。

试验采用不完全hoagland营养液，营养液组成： 2.0mmol·l-1mgso4·7h2o、2.

5mmo l·l-1 k2so.0mmol·l-1ca(h2po.2mmol·l-1 mgso4；以及阿农微量元素混合液：

2.860 g·l-1h3bo.810g·l-1mncl2·4h2o、0.

220g·l-1 znso4·7h2o、0.080g·l-1cuso4·5h2o、0.025 g·l-1 na2 moo4·2h2 o。

fe由0.005 g·l-1fe-edta (na2 –ed ta和feso4)提供。

三）试验处理。

小黑麦种子用10% h2o2消毒30min，洗净后用蒸馏水浸种6h，置于植物恒温恒湿智能培养箱中（温度25℃，湿度60%）催芽，然后播于已消毒石英砂盘中进行育苗，每天用一定量去离子水浇灌，保持一定湿度。

出苗后用1/4浓度的营养液浇灌培养，二叶一心时选取长势一致幼苗去胚乳转移至2.5l不透光塑料盆中，每盆5孔，每孔2株，用打孔的硬质泡沫板（厚度2 cm，孔径2 cm）和海绵固定幼苗。移入盆后，用1/2营养液培养一周，待根系长到5-7 cm后，改用不同供氮处理营养液。

培养期间每3天更换1次营养液并用气泵通气，每天通气2次，每次2 h。每天用0.1 mol l-1的hcl或naoh调节营养液的ph到6左右，同时补充适量去离子水维持营养液体积为2.

5 l。为防止作物缺铁，隔天每盆补充1.5 ml 0.

005g·l-1 fe-edta。

试验设5个供氮水平，以nano3进行供给，浓度分别为0.04，0.40，2.

00，4.00，8.00 mmol·l-1。

试验共15个处理，每个处理重复5次。水培试验在防雨网室中进行，溶液培养30天后收获。

三、测定项目。

收获植株时选取生长较为一致的植株扫描根系形态，测定根系活力。收获植株按根茎叶分开。部分样品105℃杀青30min，在70℃烘干至恒重，测定干物质量，粉碎过筛制成干样，用于氮含量的测定。

另一部分在液氮中固定10min后保存于-80℃超低温冰箱，用于根系及叶片氮代谢酶(硝酸还原酶、谷氨酰胺合成酶、谷氨酸合成酶、谷氨酸脱氢酶)的测定。