微生物制药作业

发布 2021-05-06 01:46:28 阅读 6160

微生物制药期末作业。

题目:硫酸庆大霉素生产工艺流程

姓名:武龙华。

班级:08生物工程。

学号:0808180062

一般的发酵流程可分为几个阶段,用以下流程图表示:

一部分菌种继续保藏。

生产菌株的获得种子的活化菌种扩大培养

一级培养二级培养接种发酵培养。

放罐分离产物产品纯化。

浓缩包装成品。

硫酸庆大霉素生产工艺流程。

硫酸庆大霉素工业发酵的总流程图。

孢子悬浮液的制备流程及工艺要求。

设备:蒸汽灭菌柜双人净化工作台。

操作步骤。1.分装纯化水至三角瓶,每瓶装150ml左右。

2.组装接种瓶及接种皮管,组装严密,包扎结实。

3.以上器材及接种用具灭菌,125±1゜c,60min。

4.在缓冲间穿好无菌衣,戴上无菌口罩,进入洁净室,符合**﹑物流进出程序。

5.用酒精棉球擦拭超净台面﹑双手,先擦台面,后擦手。

6.开启超净台通风,观察风速是否正常,将接种瓶、皮管、无菌水、接种铲及斜面摆在洁净台上。

7.将灭菌纯化水倒入茄子瓶中,一瓶纯化水倒两只茄子瓶。

8.用接种铲将孢子刮下制成孢子悬浮液,用力适度,勿刮出培养基碎屑。

9.打开接种瓶瓶口,将孢子悬浮液全部倒入接种瓶中,注意不要倒在瓶口处,然后重新组装好接种瓶及接种皮管。

10. 制备完毕关闭洁净台,出洁净室,符合**、物流进出程序。

物料指标。一级种子发酵培养。

操作步骤。1.校正量具,小于1kg用台秤,大于1kg用磅秤。

2.先后将淀粉,玉米粉,硝酸钾,蛋白胨,轻质碳酸钙称好后装在编织袋中,准备投料。

3.向事先冲洗干净并压净的一级罐中加水至埋住下层搅拌桨时,开搅拌,然后将称好的物料缓缓加入罐中,再分别量取2%氯化钴溶液和豆油加入罐中,加水至所需体积。上紧罐盖,准备灭菌。

4.打开罐底阀,放掉夹套水,夹层通蒸汽预热至90℃后关闭。

5.由取样管、压出管、进气管3路进蒸汽,进行直接蒸汽灭菌。升温,当罐压达0.1mpa时,保压30min。保压过程重要适当控制进气、排气。

6.灭菌结束,先关排气阀,后关进气阀,当罐压低于空气分过滤器压力时,再开空气进气阀,控制排气要适当。

7.打开夹层冷水阀,关闭罐底阀,打开回水阀降温至38℃时关闭。消罐人员停搅拌,进行压差接种。

8.消罐人员停搅拌,将罐压降至0.04mpa, 看罐人员配合种子组人员接种,先取无菌样,接种前点燃火圈烧接种口,对接种口消毒,火焰要大,要均匀。用火圈保护打开接种咀套管。

9.种子人员一手持接种瓶,一手将接种皮管插入接种咀。种子罐放在木盒或双层布袋中以防爆裂,关闭种子罐机械搅拌。

当罐压降至0.03-0.04mpa,种子组人员在火焰保护下将接种头上的纱布迅速插入接种口上。

10.种子人员高举接种瓶并倒置,再由消罐人员慢慢降低罐压至0.04mpa,借压将接种瓶中的孢子悬液引入罐内。

一次接种不完可以重复多次至接种完毕。罐压应维持在0.04-0.

08 mpa之间。

11.接种完毕,先关接种阀,再拔接种皮管,并拧上接种咀套管。

12.调节进排气控制罐阀,空气流量达到工艺要求,并开搅拌,交值班。

实际培养参数控制。

培养参数控制。

镜检。镜检步骤。

1.取样打开蒸汽阀先灭菌,然后关蒸汽阀,打开取样阀取样。取样完毕后关阀,再次打开蒸汽阀灭菌,关闭。

2 用载玻片沾取一薄层发酵液,加热以使发酵液固定在载玻片上,然后滴加美兰溶液进行染色,在显微镜下观察目的菌的菌丝形态。

3.配制酚红肉汤培养基,在培养基中加入发酵液在恒温箱中进行培养。一定条件下观察培养基颜色的变化来判断是否染菌。

4.另取样用粘度计测粘度。

一级种子镜检。

1.正常标准

菌丝形态:实团,网团,边散,伸展,原生质充足。

无菌度: 正常,即无杂菌污染。

3.实例批号21011097

一级种子镜检生长指标。

二级种子的培养。

操作步骤。1.校正量具,小于1kg用台秤,大于1kg用磅秤。

2.向配料罐中加水埋住下层搅拌,开搅拌,将淀粉,玉米粉,硝酸钾,蛋白胨,轻质碳酸钙投入配料罐,最后再量取泡敌加入,并加水至所需体积,搅拌15min,开启打料泵往事先准备的空罐中打料。打料完毕,关闭打料泵,停搅拌。

3.上紧罐盖,关闭罐上所有连接管道二道阀,打开所有靠罐阀及小排气阀准备灭菌。

4.打开罐底阀,放掉夹套水,夹层通蒸汽预热至90℃后关闭。

5.由取样管、压出管、进气管3路进蒸汽,进行直接蒸汽灭菌。升温,当罐压达0.1mpa时,保压30min。保压过程重要适当控制进气、排气。

6.灭菌结束,先关排气阀,后关进气阀,当罐压低于空气分过滤器压力时,再开空气进气阀,控制排气要适当。

7.打开夹层冷水阀,关闭罐底阀,打开回水阀降温至38℃时关闭。

8.调好给种罐至受种罐接种管道上各阀门,打开给种罐压出管道进汽阀,进行接种管道直接蒸汽灭菌,蒸汽压力0.2mpa,灭菌2小时。

9.灭菌完毕,调好接种管道各阀门,从受种罐通入无菌空气冷却管道,冷却至接种管道不烫手。调好管道各阀门保压等接种通知。

10.接种时关闭给种罐排气阀,使罐压升高,打开受种管排气阀使罐压降低。调好接种管道各阀门,借压差进行接种。

11.接种完毕,调好接种管道各阀门,打开给种罐压出管道进汽阀通入蒸汽冲净管道。

12.调节进气、排气、消空气流量达工艺要求,开搅拌,交值班。

进料状况 表4 二级种子培养进料状况。

二级种子镜检。

1.正常标准

菌丝形态:网团,边散,伸展,连片、原生质充足。

无菌度: 正常,即无杂菌污染。

2.实例批号 21011097

5 二级种子镜检生产指标。

实际培养参数控制。

表6 二级培养参数控制指标。

**种子发酵。

操作步骤。1.校正量具,小于1kg用台秤,大于1kg用磅秤。

2.向配料罐中加水埋住下层搅拌,开搅拌,将淀粉,玉米粉,硝酸钾,蛋白胨,轻质碳酸钙投入配料罐,最后再量取泡敌加入,并加水至所需体积,搅拌15min,开启打料泵往事先准备的空罐中打料。打料完毕,关闭打料泵,停搅拌。

3.上紧罐盖,关闭罐上所有连接管道二道阀,打开所有靠罐阀及小排气阀准备灭菌。

4.打开罐底阀,放掉夹套水,夹层通蒸汽预热至90℃后关闭。

5.由取样管、压出管、进气管3路进蒸汽,进行直接蒸汽灭菌。升温,当罐压达0.1mpa时,保压30min。保压过程重要适当控制进气、排气。

6.灭菌结束,先关排气阀,后关进气阀,当罐压低于空气分过滤器压力时,再开空气进气阀,控制排气要适当。

7.打开蛇形管冷水阀进行降温,关闭罐底阀,打开回水阀降温至38℃时关闭排气阀保压准备进行接种。

8.调好给种罐至受种罐接种管道上各阀门,打开给种罐压出管道进汽阀,进行接种管道直接蒸汽灭菌,蒸汽压力0.2mpa,灭菌2小时。

9.灭菌完毕,调好接种管道各阀门,从受种罐通入无菌空气冷却管道,冷却至接种管道不烫手。调好管道各阀门保压等接种通知。

10.接种时关闭给种罐排气阀,使罐压升高,打开受种管排气阀使罐压降低。调好接种管道各阀门,借压差进行接种。

11.接种完毕,调好接种管道各阀门,打开给种罐压出管道进汽阀通入蒸汽冲净管道。

12.调节进气、排气、消空气流量达工艺要求,开搅拌,交值班。

进料状况。表7 **种子培养进料状况。

**种子镜检。

1. 正常标准

菌丝形态:散网、伸展,连片、量多。

无菌度: 正常,即无杂菌污染。

2.实例批号 301/327

表9 **种子镜检生产指标。

提炼车间生产概况和流程

提炼组的任务是将庆大霉素从来自发酵车间的发酵液中提炼出来,同时也负责本车间低单位稀氨洗脱液和成盐炭脱车间活性炭滤饼中庆大霉素的提取,并最终得到含庆大霉素的洗脱液,送入浓缩岗位浓缩。

生物制药作业

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