实验室操作规范。
本规程中列出了最基本的实验室操作和程序，他们是微生物学操作技术规范的基础。在规划实验室和国家级实验室项目时，可以根据这些规程来制订实验室安全操作的书面程序。
每个实验室都应该采用“安全手册”或“操作手册”，其中定义了已知的和潜在的危害，并。
规定了特殊的操作程序来避免或尽量减小这种危害。规范的微生物学操作技术是实验室安全的基础，而专门的实验设备仅仅是一种补充，绝不能替代正确的操作规范。下面列出了一些最重要的。
概念。进入规定。
1、在处理危险度2 级或更高危险度级别的微生物时，在实验室门上应标有国际通用的生物。
危害警告标志（图1）。
2、只有经批准的人员方可进入实验室工作区域。
3、实验室的门应保持关闭。
4、儿童不应被批准或允许进入实验室工作区域。
5、进入动物房应当经过特别批准。
6、与实验室工作无关的动物不得带入实验室。
人员防护。1、在实验室工作时，任何时候都必须穿着连体衣、隔离服或工作服。
2、在进行可能直接或意外接触到血液、体液以及其他具有潜在感染性的材料或感染性动物。
的操作时，应戴上合适的手套。手套用完后，应先消毒再摘除，随后必须洗手。
3、在处理完感染性实验材料和动物后，以及在离开实验室工作区域前，都必须洗手。
4、为了防止眼睛或面部受到泼溅物、碰撞物或人工紫外线辐射的伤害，必须戴安全眼镜、
面罩（面具）或其他防护设备。
5、严禁穿着实验室防护服离开实验室，（如去餐厅、咖啡厅、办公室、图书馆、员工休息。
室和卫生间）。
6、不得在实验室内穿露脚趾的鞋子。
7、禁止在实验室工作区域进食、饮水、吸烟、化妆和处理**眼镜。
8、禁止在实验室工作区域储存食品和饮料。
9、在实验室内用过的防护服不得和日常服装放在同一柜子内。
操作规范。1、严禁用口吸移液管。
2、严禁将实验材料置于口内。严禁舔标签。
3、所有的技术操作要按尽量减少气溶胶和微小液滴形成的方式来进行。
4、应限制使用皮下注射针头和注射器。除了进行肠道外注射或抽取实验动物体液，皮下注。
射针头和注射器不能用于替代移液管或用作其他用途。
5、出现溢出、事故以及明显或可能暴露于感染性物质时，必须向实验室主管报告。实验室。
应保存这些事件或事故的书面报告。
6、必须制订关于如何处理溢出物的书面操作程序，并予以遵守执行。
7、污染的液体在排放到生活污水管道以前必须清除污染（采用化学或物理学方法）。根据。
所处理的微生物因子的危险度评估结果，可能需要准备污水处理系统。
8、需要带出实验室的手写文件必须保证在实验室内没有受到污染。
实验室中标本的安全操作。
实验室标本的收集、运输和处理不当，会带来使相关人员感染的危险。
标本容器。标本容器可以是玻璃的，但最好使用塑料制品。标本容器应当坚固，正确地用盖子或塞子盖。
好后应无泄漏。在容器外部不能有残留物。容器上应当正确地粘贴标签以便于识别。标本的要求。
或说明书不能够卷在容器外面，而是要分开放置，最好放置在防水的袋子里。
标本在设施内的传递。
为了避免意外泄漏或溢出，应当使用盒子等二级容器，并将其固定在架子上使装有标本的容。
器保持直立。二级容器可以是金属或塑料制品，应该可以耐高压灭菌或耐受化学消毒剂的作用。
密封口最好有一个垫圈，要定期清除污染。
标本接收。需要接收大量标本的实验室应当安排专门的房间或空间。
打开包装。接收和打开标本的人员应当了解标本对身体健康的潜在危害，并接受过如何采用标准防护方法[3]
的培训，尤其是处理破碎或泄漏的容器时更应如此。标本的内层容器要在生物安全柜内打开，并准。
备好消毒剂。
移液管和移液辅助器的使用。
1、应使用移液辅助器，严禁用口吸取。
2、所有移液管应带有棉塞以减少移液器具的污染。
3、不能向含有感染性物质的溶液中吹入气体。
4、感染性物质不能使用移液管反复吹吸混合。
5、不能将液体从移液管内用力吹出。
6、刻度对应（mark-to-mark）移液管不需要排出最后一滴液体，因此最好使用这种移液管。
7、污染的移液管应该完全浸泡在盛有适当消毒液的防碎容器中。移液管应当在消毒剂中浸。
泡适当时间后再进行处理。
8、盛放废弃移液管的容器不能放在外面，应当放在生物安全柜内。
9、有固定皮下注射针头的注射器不能够用于移液。
10、在打开隔膜封口的瓶子时，应使用可以使用移液管的工具，而避免使用皮下注射针头和注射器。
11、为了避免感染性物质从移液管中滴出而扩散，在工作台面应当放置一块浸有消毒液的布。
或吸有消毒液的纸，使用后将其按感染性废弃物处理。
避免感染性物质的扩散。
1、为了避免被接种物洒落，微生物接种环的直径应为2～3mm 并完全封闭，柄的长度应小。
于6cm 以减小抖动。
2、使用封闭式微型电加热器消毒接种环，能够避免在本生灯的明火上加热所引起的感染性。
物质爆溅。最好使用不需要再进行消毒的一次性接种环。
3、干燥痰液标本时要注意避免生成气溶胶。
4、准备高压灭菌和／或将被处理的废弃标本和培养物应当放置在防漏的容器内（如实验室。
废弃物袋）。在丢弃到废弃物盛器中以前，顶部要固定好（如采用高压灭菌胶带）。
5、在每一阶段工作结束后，必须采用适当的消毒剂清除工作区的污染。
详细资料见参考文献12。
生物安全柜的使用。
1、应参考国家标准和相关文献，对所有可能的使用者都介绍生物安全柜的使用方法和局限。
性（参见第10 章）。应当发给工作人员书面的规章、安全手册或操作手册。特别需要明确的是，当出现溢出﹑破损或不良操作时，安全柜就不再能保护操作者。
2、生物安全柜运行正常时才能使用。
3、生物安全柜在使用中不能打开玻璃观察挡板。
4、安全柜内应尽量少放置器材或标本，不能影响后部压力排风系统的气流循环。
5、安全柜内不能使用本生灯，否则燃烧产生的热量会干扰气流并可能损坏过滤器。允许使。
用微型电加热器，但最好使用一次性无菌接种环。
6、所有工作必须在工作台面的中后部进行，并能够通过玻璃观察挡板看到。
7、尽量减少操作者身后的人员活动。
8、操作者不应反复移出和伸进手臂以免干扰气流。
9、不要使实验记录本﹑移液管以及其他物品阻挡空气格栅，因为这将干扰气体流动，引起。
物品的潜在污染和操作者的暴露。
10、工作完成后以及每天下班前，应使用适当的消毒剂对生物安全柜的表面进行擦拭。
11、在安全柜内的工作开始前和结束后，安全柜的风机应至少运行5min。
12、在生物安全柜内操作时，不能进行文字工作。
避免感染性物质的食入以及与**和眼睛的接触。
1、微生物操作中释放的较大粒子和液滴（直径大于5μm）会迅速沉降到工作台面和操作者。
的手上。实验室人员在操作时应戴一次性手套，并避免触摸口、眼及面部。
2、不能在实验室内饮食和储存食品。
3、在实验室里时，嘴里不应有东西——钢笔、铅笔、口香糖。
4、不应在实验室化妆。
5、在所有可能产生潜在感染性物质喷溅的操作过程中，操作人员应将面部、口和眼遮住或。
采取其他防护措施。
避免感染性物质的注入。
1、通过认真练习和仔细操作，可以避免破损玻璃器皿的刺伤所引起的接种感染。应尽可能。
用塑料制品代替玻璃制品。
2、锐器损伤（如通过皮下注射针头、巴斯德玻璃吸管以及破碎的玻璃）可能引起意外注入。
感染性物质。
3、以下两点可以减少针刺损伤：（a）减少使用注射器和针头（可用一些简单的工具来打开。
瓶塞，然后使用吸管取样而不用注射器和针头）；（b）在必须使用注射器和针头时，采用锐器安全装置。
4、不要重新给用过的注射器针头戴护套。一次性物品应丢弃在防∕耐穿透的带盖容器中。
5、应当用巴斯德塑料吸管代替玻璃吸管。
冰箱与冰柜的维护和使用。
1、冰箱、低温冰箱和干冰柜应当定期除霜和清洁，应清理出所有在储存过程中破碎的安瓿。
和试管等物品。清理时应戴厚橡胶手套并进行面部防护，清理后要对内表面进行消毒。
2、储存在冰箱内的所有容器应当清楚地标明内装物品的科学名称、储存日期和储存者的姓。
名。未标明的或废旧物品应当高压灭菌并丢弃。
3、应当保存一份冻存物品的清单。
4、除非有防爆措施，否则冰箱内不能放置易燃溶液。冰箱门上应注明这一点。
装有冻干感染性物质安瓿的开启。
应该小心打开装有冻干物的安瓿，因为其内部可能处于负压，突然冲入的空气可能使一些物。
质扩散进入空气。安瓿应该在生物安全柜内打开，建议按下列步骤打开安瓿：1、首先清除安瓿外表面的污染。
2、如果管内有棉花或纤维塞，可以在管上靠近棉花或纤维塞的中部锉一痕迹。
3、用一团酒精浸泡的棉花将安瓿包起来以保护双手，然后手持安瓿从标记的锉痕处打开。
4、将顶部小心移去并按污染材料处理。
5、如果塞子仍然在安瓿上，用消毒镊子除去。
6、缓慢向安瓿中加入液体来重悬冻干物，避免出现泡沫。
装有感染性物质安瓿的储存。
装有感染性物质的安瓿不能浸入液氮中，因为这样会造成有裂痕或密封不严的安瓿在取出时。
破碎或**。如果需要低温保存，安瓿应当储存在液氮上面的气相中。此外，感染性物质应储存在低温冰箱或干冰中。
当从冷藏处取出安瓿时，实验室工作人员应当进行眼睛和手的防护。以这种方式储存的安瓿在取出时应对外表面进行消毒。
对血液和其他体液、组织及排泄物的标准防护方法。
设计标准防护方法（其中包括“常规预防措施[19]”）以降低从已知或未知感染源的微生物传。
播危险[2]。
标本的收集、标记和运输。
1、始终遵循标准防护方法[2]；所有操作均要戴手套。
2、应当由受过培训的人员来采集病人或动物的血样。
3、在静脉抽血时，应当使用一次性的安全真空采血管取代传统的针头和注射器，因为这样。
可以使血液直接采集到带塞的运输管和／或培养管中。用完后自动废弃针头。
4、装有标本的试管应置于适当容器中运至实验室（运输要求见第15 章），在实验室内部转。
运也应这样（见本章关于“在设施内转移标本”部分）。检验申请单应当分开放置在防水袋或信。
封内。5、接收人员不应打开这些袋子。
打开标本管和取样。
1、应当在生物安全柜内打开标本管。
2、必须戴手套，并建议对眼睛和黏膜进行保护（护目镜或面罩）。
3、在防护衣外面要再穿上塑料围裙。
4、打开标本管时，应用纸或纱布抓住塞子以防止喷溅。
玻璃器皿和“锐器”
1、尽可能用塑料制品代替玻璃制品。只能用实验室级别（硼硅酸盐）的玻璃，任何破碎或。
假期安全手册
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