1.受试生物。
1.1受试生物的选择。
一般采用幼鱼或鱼苗,也可选用虾类等游动性动物。
1.2受试生物的采集。
—受试生物可从自然海区采集或向养殖场购买;
—应是健康、无病、无损伤、游动活泼者;
—采集时避免离水、最好用桶捞取,小心移入运输容器;
—运输容器应先事先清洗干净,灭菌。运输过程中英尽量避碰撞,并注意充气增氧。
2.污染水样的处理及试液的制备。
2.1污染水样采集及处理。
2.1.1采样应用无毒容器,水样应装满,以免运输过程剧烈摇荡而改变某些水质特性。采集的水样量,应按实验设计和次数备足。同一系列试验,应用同时同地采的污水。
2.1.2采水时应记录采样时间、地点,现场测量水温,并观察记录污染的表观现象。
2.1.3采回的水样最好立即用于实验,若需放置,应低温保存。水样应进行化学分析,测定其盐度、ph、水温、溶解氧、化学耗氧量、营养盐及主要污染物含量,为配制致毒试液提供参考。
2.2试液的配制。
2.2.1用于回避试验的污染水样应用时现配,用洁净海水逐级稀释,配制成所需浓度的试液。
2.2.2试验浓度范围一般可选取lc50的0.05~0.5倍量并在该浓度范围内按等比级数设计5个以上实验组。
3.试验步骤。
a)洗净回避槽,注入清洁海水,使槽内水位高度能使受试鱼自由活动,放入10尾受试鱼,驯养0.5h~1.0h;
b)在两个供水设备中,分别盛放清洁海水和待试试液;
c)用乳胶管连接回避槽与两供水容器的进出水口,控制适当的相同流量;
d)先把计时器拨到预定的试验时间,在放海水和试液进入槽内的同时,启动计时器,试验开始;
e)待到预定的试验时间,自控装置自动关闭闸板。观查清水区,试液区和混合区鱼的分布和游动情况,并把鱼在各区内的尾数记入表中;
f)把受试后的鱼移入清洁海水中暂养24h,观察其活动和存活情况,以确定是否发生死亡或其他迟发性中毒症状;
g)每次试验结束,应把回避槽内的水放净,用清洁海水冲洗数遍后,再进行下一组试验。
4.记录计算。
测试结果记入表中,按式(17)计算回避率,数值以%表示:
p=(e-a)/t×10017)
式中:e——清洁海水区鱼的尾数;
a——污水试液区鱼的尾数;
t——两区内鱼的总尾数。
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