1. 常用化学试剂的分级。
2. 影响电泳的因素。
3. 玻璃仪器的清洗有哪些基本要求?
4. 请分别叙述分光光度技术、层析技术、电泳技术的原理及实验注意事项。
5. 血液样品、尿液样品及组织样品制备的常用方法有哪些?
6. 请叙述72-1型分光光度计的应用范围及使用方法。p23
7. 为什么正常人血清脂蛋白电泳时见不到乳糜微粒区带?42
8. 与醋酸纤维素薄膜电泳比较,聚丙烯酰胺凝胶电泳有何优缺点?47
9. page 电泳与葡聚糖凝胶层析的分子筛效应一样吗?
10. 如何运用血乳酸指标监控运动强度?
11. 如何运用血乳酸指标评定运动员有氧代谢能力和无氧代谢能力?- 54
12. 血清肌酸激酶测定在运动员机能状态评定及疾病**评价中有何意义?63
13. 如何利用尿肌酐测定评价运动员的身体机能?
14. 日肌酐排泄量增高,是否表明尿肌酐系数增高?为什么?
15. 染色体dna 与质粒dna 分离的主要依据是什么?
16. 简述sds-page 测定蛋白质分子量的原理。
17. 做好本实验的关键是什么?
18. 除本实验采用的方法外,蛋白分子量的测定还有哪些方法?
19. 该实验中是如何去除蛋白间电荷效应的?
20. 使sds-page 具有高分辨率的3个因素是什么?
21. 1.凝胶过滤法。
22. 凝胶过滤法分离蛋白质的原理是根据蛋白质分子量的大小。由于不同排阻范围的葡聚糖凝胶有一特定的蛋白质分子量范围,在此范围内,分子量的对数和洗脱体积之间成线性关系。
因此,用几种已知分子量的蛋白质为标准,进行凝胶层析,以每种蛋白质的洗脱体积对它们的分子量的对数作图,绘制出标准洗脱曲线。未知蛋白质在同样的条件下进行凝胶层析,根据其所用的洗脱体积,从标准洗脱曲线上可求出此未知蛋白质对应的分子量。
23. 2.sds-聚丙烯酰胺凝胶电泳法。
24. 蛋白质在普通聚丙烯酰胺凝胶中的电泳速度取决于蛋白质分子的大小、分子形状和所带电荷的多少。sds(十二烷基磺酸钠)是一种去污剂,可使蛋白质变性并解离成亚基。
当蛋白质样品中加入sds后,sds与蛋白质分子结合,使蛋白质分子带上大量的强负电荷,并且使蛋白质分子的形状都变成短棒状,从而消除了蛋白质分子之间原有的带电荷量和分子形状的差异。这样电泳的速度只取决于蛋白质分子量的大小,蛋白质分子在电泳中的相对迁移率和分子质量的对数成直线关系。以标准蛋白质分子质量的对数和其相对迁移率作图,得到标准曲线,根据所测样品的相对迁移率,从标准曲线上便可查出其分子质量。
25. 3.沉降法(超速离心法)
26. 沉降系数(s)是指单位离心场强度溶质的沉降速度。s也常用于近似地描述生物大分子的大小。
蛋白质溶液经高速离心分离时,由于比重关系,蛋白质分子趋于下沉,沉降速度与蛋白质颗粒大小成正比,应用光学方法观察离心过程中蛋白质颗粒的沉降行为,可判断出蛋白质的沉降速度。根据沉降速度可求出沉降系数,将s带入公式,即可计算出蛋白质的分子质量。
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高级生化 考试重点 ii班动物方向 题型 名词解释10个 简述题5个 论述题2个。第一章蛋白质结构与功能。1.蛋白质二级结构构象单元。蛋白质的二级结构 secondary structure 是多肽链主链 backbone 在氢键等次级键作用下折叠成的构象单元或局部空间结构,未考虑侧链的构象和整个肽...
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