2023年园艺植物生物技术考试复习题。
一、名词解释。
原生质体---采用机械或酶解法去掉了细胞壁的裸露的且具有活力的细胞。
简单重复序列（ssr）--真核生物的基因组中普遍存在着的二核苷酸、三核苷酸或四核苷酸的简单串联重复序列。
ms培养基---是一类含有较高的无机盐的较稳定的离子平衡溶液，硝酸盐含量高，其养分的数量和比例合适，能满足植物细胞的营养和生理需要的培养基。
愈伤组织---在人工培养基上由外植体长出来的一团无序生长的薄壁细胞。
褐变---外植体切割后，体内所含有的酚类化合物被多酚氧化酶氧化形成褐色的醌类化合物及其他反应的现象。
形态建成--外植体细胞在适宜的培养条件下发生脱分化、再分化，产生芽和根，或者形成胚状体，发育成苗或完整植株。
细胞全能性---一个活细胞所具有的发育成完整植株的潜在能力。
灭菌---指杀灭或清除外环境传播媒介上的所有微生物（包括细菌芽胞）的过程。
cdna library---将某生物某一发育时期所转录的mrna经反转录形成的cdn**段与某种载体连接而形成的克隆的集合。
northern 印迹杂交---一种将rna从琼脂糖凝胶中转印到硝酸纤维素膜上的方法。
脱分化---培养条件下，使一个已分化的细胞恢复到原始无分化状态或分生细胞状态的过程。
外植体---植物组织培养中用来进行无菌培养的离体材料，可以是器官、组织、细胞和原生质体等。
玻璃化现象---在长期的离体培养繁殖时，有些试管苗嫩茎，叶片呈现半透明水状。
继代培养---培养物在培养基上生长一段时间以后，由于营养物质枯竭，水分散失，以及代谢产物的积累，必须转移到新鲜培养基上培养，这个过程叫做继代培养。
无菌操作---指在严格灭菌的空间和使用器皿，以及人的手和衣服都不带菌的条件下进行的操作。
植物组织培养---通过无菌操作，把植物体的器官、组织、细胞甚至原生质体，接种于人工配置的培养基上，在人工控制的环境条件下进行培养，使之生长、繁殖或长出完整植株的技术和方法。
2、填空题。
1. 组培实验室必要的设备有（ 生化培养箱培养基分装器冰箱摇床和超净工作台 ）等。
2. 实验室设计原则（便于隔离、便于操作、便于灭菌、便于观察。
3. 在固体培养时琼脂是使用最方便、最好的（ 固化剂一般用量为（ 0.7%-1% ）之间。
4. 培养基灭菌一般在（100）kpa的压力下，锅内温度达（ 121 ）℃维持（ 20 ）min.。
5. white 培养基的特点是（ 无机盐浓度较低和（ 在生根培养、胚胎培养中有良好的效果。
6. 糖在组织培养中是不可缺少的，它不但离体组织赖以生长的（ 碳源物质而且还能维持（ 培养系统的渗透压。
7. 组织培养中常用的灭菌方法有（高压蒸汽消毒灭菌干热消毒灭菌灼烧灭菌等。
8. 培养基中加入活性炭的目的（ 吸附培养基及培养物分泌物中的抑制物质、抑制外植体褐变、防止玻璃苗的产生、促进培养物生长和分化、促进生根。
9. 原生质体的分离方法有（ 酶解法 ）和（ 机械法。
10. 分子标记主要应用于（ 种质评价和核心种质筛选杂种鉴定和早起辅助选择连锁遗传图谱的鉴定。
11. 目前培育无病毒苗最广泛和最重要的一个途径是。
12. 培养基常用的碳源是（ 蔗糖使用浓度在1%-5%，常用。
13. ctab溶液在低于（ 15摄氏度 ）时会形成沉淀析出，因此在将其加入冰冷的植物材料之前必须预热（65摄氏度），且离心时温度不要低于（ 15摄氏度 ）。
三、简答题。
1、介绍组织培养中常用的灭菌方法？
分为物理方法和化学方法两类。
1）物理方法如干热（烘烧和灼烧）、湿热（常压或高压蒸煮）、射线处理（紫外线、超声波、微波）、过滤和大量无菌水冲洗等措施；
2）化学方法是使用升汞、甲醛、过氧化氢、高锰酸钾、来苏儿、漂白粉、次氯酸钠、抗菌素、酒精化学药品处理。
2、介绍蓝白斑筛选的基本原理。
3、常用的培养基有哪些？说明其特点。
1）ms培养基：目前应用最广泛的培养基。特点是无机离子浓度较高。
2）white培养基：无机盐浓度较低，适于生根培养。
3）n6培养基：kno3和（nh4）2so4含量高，不含钼。广泛应用于禾谷类植物的花粉培养。
4）b5培养基：主要特点是含有较低的铵盐，较高的硝酸盐和盐酸硫铵素，适宜双子叶植物特别是木本植物的培养。
4、pcr反应引物的设计基本要求？
5、例举能证明dna是遗传物质的经典试验？
肺炎链球菌转化实验。
噬菌体感染实验。
病毒重建实验。
6、什么是α—互补筛选？
lacz（半乳糖苷酶）有两个主要的亚基，α亚基和 ω亚基，前者的dna序列很短，后者比较长。α 与 ω 相结合就能表现出半乳糖苷酶活性？？？
7、介绍外植体生长和分化途径？
8、目前植物病毒鉴定和检测方法有哪些？各有何特点？
1）视觉观察法（直接检测法）：看植株的茎叶是否有该病毒所有可见症状；
2）生物鉴定发（指示植物法）：可采用汁液接种法和嫁接接种法，利用嫁接法接种，把待测的植物接种在敏感植物上，然后视其有无病斑，判断是否脱毒。
3）电子显微镜鉴定法：用电子显微镜直接观察是否存在病毒粒子。
4）抗血清鉴定法：利用抗原与抗体特异反应的特性，用已知病毒的抗血清来鉴定未知病毒的种类。
四、问答题：
1、介绍分子标记的发展与基本类型。
自1980botstein 首先提出的基因组dna的限制性片段长度多态性并作为遗传标记应用于人类的基因组作图后，人们发展了多种基因组dna多态性的分子标记技术。
主要类型：2、试论述植物rna干扰的过程或原理及该技术的应用。
3、试以一种植物及目标基因为例，论述农杆菌介导的植物转基因的过程。
4、dna提取常见问题、原因分析及其对策。
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