实验名称:绿僵菌抗药性菌株的驯化选育。
摘要。绿僵菌(metarhizium anisopliae)半知菌类、丛梗菌目、丛梗霉科、绿僵菌属,具有广谱性。绿僵菌对寄主的入侵是寄主与病原菌之间的生理生化作用的综合结果,可通过体壁、气门、消化道等多种途径侵染宿主,其中体壁途径是主要方式。
本文研究嘧霉胺驯化诱导绿僵菌产生抗性菌株,研究绿僵菌对嘧霉胺的抗性风险。
绿僵菌在含嘧霉胺的培养基上经逐代驯化,获得了抗嘧霉胺的菌株r1、r2、r3、r4,经抗药性水平测定, r1、r2、r3、r4的抗性倍数分别为10ug/ml,100ug/ml,500ug/ml,1000ug/ml四株抗药性菌株均为对嘧霉胺的抗性菌株。
本文比较了抗药性菌株和敏感性菌株的生物学性状。采用菌丝生长速率法测定了抗性菌株与敏感菌株的菌丝生长速率,结果表明经7d培养抗性菌株菌落直径在0.5-1.
1cm之间,而敏感菌株为1.3cm,生长速率存在明显差异;在及抗性菌株与敏感菌株的产孢量大约都在3.6×107个/ml,说明室内诱导的高抗突变体不能正常生长,菌株对药剂的抗药性水平与菌株产孢能力没有相关性,而是由菌株本身决定的。
本试验初步研究了抗性菌株的遗传稳定性,抗性菌株的第零代到第六代的的结果表明绿僵菌的抗药性菌株与敏感菌株的不同转代的有差异性,从第零代第三代到第九代逐渐减小,第零代与第三代和第六代下降明显,第三代与第六代下降幅度很小,但始终保持着对嘧霉胺的高等抗性,表明抗性菌株具有良好的遗传稳定性。
关键词:绿僵菌;嘧霉胺;抗性菌株;生物学特性;遗传稳定性。
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