一、 目的：分离病毒、定性。
二、 地点：西孵化厅，三台机器：一台孵化鸡胚；一台操作室；一台做更衣及杂物室；
三、 所需设备、仪器：低温离心机（8000~12000转）；培养箱、-30℃冰箱；高压锅；无菌操作台、紫外线灯及消毒设施、电磁炉、铝锅。
四、 试剂耗材：离心管.5ml）；一次性1ml注射器；移液器1ml、0.
2ml、8排枪移液器、血凝平板、阳性血清、手动研磨器、青链霉素、打口器、封口腊、封口膜、spf种蛋、棉拭子、一次性手套、
五、 监测内容：病料和鸡分泌物。
六、 操作步骤：
1、 spf种蛋采购计划，孵化各胚龄种蛋；划气室；病料处理；研磨、离心、取上清液、加青链霉素（3000~4000iu/ml）、静置/37度孵育30min；
2、 用0.25~0.45μm滤膜过滤尿囊液后，接种：
9~11日龄鸡胚、碘酊消毒气室、酒精脱碘、在气室上方打孔、每份病料接种原液0.1和10倍稀释液0.1ml至各两个鸡胚尿囊腔、石蜡封口、孵化（大头向上、禁止翻蛋）
（死胚弃掉、收集灭活）、每6小时观察，收集24小时以后死亡鸡胚，72小时未死亡鸡胚，冷冻致死，观察鸡胚病变或灭活放弃（48h后收集鸡胚，24h内死亡弃掉）
4、 收集尿囊液：酒精消毒蛋表面、用镊子打开气室、剥开尿囊膜、用移液器收集尿囊液、每只鸡胚放3个1.5ml离心管、标记、剩余鸡胚及残留收集灭活。
5、 其中之一接种9~11日龄鸡胚（盲传2）、另两份冷冻保存。
6、 重复，盲传3
7、 收集尿囊液，进行血凝实验；无血凝性用胰酶处理继续血凝实验；无血凝性收集灭活（含前保留样品）
8、 有血凝性的样品用阳性血清定性。
9、 未知样品分类、定性？
操作安全性保证。
1、 定人、专人操作，不得接触生产现场。
2、 进、出洗澡，一次更衣、鞋（分开放置、专用）
3、 到工作地点后更换防护服、鞋套、口罩、帽子。
4、 离开时脱下上述衣物，保留在工作地点消毒，期间不得随意走动。
5、 场地紫外线长期消毒。
6、 工作后所有废弃物亲自销毁。
7、 接触场地每次消毒。
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